血清鐵濃度檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

微量法 100T/96S

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

測(cè)定意義：

血清鐵是指血液中轉(zhuǎn)鐵蛋白所結(jié)合的鐵，該指標(biāo)常用于鑒別缺鐵性與非缺鐵性貧血。

測(cè)定原理：

亞硫酸鈉還原血清Fe³⁺生成成Fe²⁺，Fe²⁺進(jìn)一步與 2, 2’- 聯(lián)吡啶顯色，在 520nm 處有吸收峰，測(cè)定該波長(zhǎng)光吸收值即可計(jì)算血清鐵含量。

血清鐵濃度檢測(cè)試劑盒 離子系列-常備現(xiàn)貨

組成：

試劑一：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前配制，加入 15 ml 蒸餾水充分溶解。

試劑二：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前配制，加入 469μl 冰醋酸，加入 15 ml 蒸餾水充分溶解。

標(biāo)準(zhǔn)液：液體 1ml×1 支（EP 管），100 μmol/L Fe³⁺標(biāo)準(zhǔn)液，4℃保存。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)

自備儀器和用品：

離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、冰醋酸、氯仿和蒸餾水。

測(cè)定：

1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30 min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到 520 nm，蒸餾水調(diào)零。

2. 標(biāo)準(zhǔn)液解凍：提前取出標(biāo)準(zhǔn)液，置于室溫下充分解凍后混勻。

3. 空白管：取EP 管，依次加入 125 μl 蒸餾水，125 μl 試劑一，125 μl 試劑二，混勻后蓋緊，置于沸水浴5min，自來(lái)水冷卻。加入 62 μl 氯仿（自備），充分震蕩混勻；室溫 10000rpm，離心 10min，小心吸取上層液 210 μl，加入微量石英比色皿/96 孔板，于 520 nm 測(cè)定吸光度，記為A 空白管。

4. 標(biāo)準(zhǔn)管：取EP 管，依次加入 125 μl 標(biāo)準(zhǔn)液，125 μl 試劑一，125 μl 試劑二，混勻后蓋緊，置于沸水浴5min，自來(lái)水冷卻。加入 62 μl 氯仿，充分震蕩混勻；室溫 10000rpm，離心 10min，小心吸取上層液 210 μl，加入微量石英比色皿/96 孔板，于 520 nm 測(cè)定吸光度，記為A 標(biāo)準(zhǔn)管。

5. 測(cè)定管：取 EP 管，依次加入 125 μl 血清，125 μl 試劑一，125 μl 試劑二，混勻后蓋緊，置于沸水浴 5min，

自來(lái)水冷卻。加入 62 μl 氯仿，充分震蕩混勻；室溫 10000rpm，離心 10min，小心吸取上層液210μl，加入微量石英比色皿/96 孔板，于 520 nm 測(cè)定吸光度，記為A 測(cè)定管。

注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。

血清鐵濃度計(jì)算公式：

血清鐵含量(μmol /dL)=[C 標(biāo)準(zhǔn)液×(A 測(cè)定管－A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管－A 空白管)]×V 總

=10 × (A 測(cè)定管－A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管－A 空白管)

C 標(biāo)準(zhǔn)液：100 μmol/L Fe³⁺標(biāo)準(zhǔn)液；V 總：標(biāo)準(zhǔn)液總體積 1ml；1 dL=0.1 L。

注意事項(xiàng)：

1、血清鐵含量少，所用器皿（EP 管）需要注意，避免被鐵污染。

2、試劑一和試劑二溶液不穩(wěn)定，需現(xiàn)配現(xiàn)用，新配制的試劑只能當(dāng)天使用。

3. zui低檢出限為 1μmol/L。

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