免疫染色洗滌液是免疫熒光(IF)、免疫組化(IHC)和免疫細胞化學(IC)等實驗中一抗或二抗孵育后的關鍵洗滌步驟，適當?shù)南礈炜梢越档捅尘?、增強信噪比? 一、稀釋配制
1、10×濃縮液的稀釋方法：
取一瓶免疫染色洗滌液(10×)，倒入潔凈的量筒中，加入去離子水或蒸餾水混勻并定容到1升后即為免疫染色洗滌液(1×)。例如，100mL的10×濃縮液可配制成1L的1×工作液。
2、保存條件：
- 10×濃縮液：4℃保存，有效期1年
- 1×工作液：4℃保存，1-2個月內(nèi)用完；室溫保存宜在1-2周內(nèi)用完
- 注意：一旦啟用后建議在2周內(nèi)用完，避免細菌污染
二、使用步驟
標準洗滌流程：
1、在固定、一抗或二抗孵育結束后，加入適量免疫染色洗滌液(1×)，使之能覆蓋樣品
2、在搖床上緩慢搖動洗滌5分鐘
3、吸盡洗滌液，再加入新的洗滌液洗滌
4、共洗滌3次，每次5分鐘
5、進行后續(xù)操作
特殊情況處理：
- 如果搖動容易導致樣品脫落，可以不搖動浸泡洗滌，但需延長洗滌時間至8-10分鐘/次，增加洗滌次數(shù)至4-5次
- 如果背景仍然較高，可繼續(xù)增加漂洗時間和次數(shù)，通常延長洗滌時間或增加洗滌次數(shù)不會對免疫染色結果產(chǎn)生負面影響
三、注意事項
1、動作輕柔：所有操作動作要盡量輕柔，避免用力吹打細胞，防止樣品脫落
2、避光操作：熒光染料標記的抗體孵育后需避光保存
3、避免污染：本產(chǎn)品經(jīng)過濾除菌處理，使用過程中應盡量避免細菌污染
4、及時使用：一經(jīng)開啟盡快用完，儲存過久的液體固定效果易下降
5、溫度控制：盡量在4℃下操作，保持實驗環(huán)境穩(wěn)定
四、產(chǎn)品特點
免疫染色洗滌液中含有適量Triton X-100，可以通透細胞膜，經(jīng)處理的細胞樣品可以檢測細胞內(nèi)的目的蛋白，包括細胞漿內(nèi)和細胞核內(nèi)的目的蛋白。按照每組樣品洗滌需要0.1-1mL計算，100mL的10×濃縮液可以洗滌1000-10000個樣品。
