諾博萊德 FlashPure Plus RNA Purification Kit

增強(qiáng)型 RNA 清潔純化試劑盒（含 miRNA）

增強(qiáng)型RNA清潔純化試劑盒 RNA提取配套產(chǎn)品

目錄號(hào):91612

產(chǎn)品內(nèi)容：

自備試劑：

無(wú)水乙醇

保存條件：

室溫（15 ~ 25℃）

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

本試劑盒不但可以純化大片段的 mRNA 等 RNA，也可以純化 miRNA 等各種小的 RNA。適用于從酶反應(yīng)液（如DNase 處理、體外轉(zhuǎn)錄、RNA 加帽、蛋白酶處理、RNA 標(biāo)記等）中純化回收RNA，也可用于從其它方式提取獲得的 RNA 的純化。

在高鹽條件下，RNA 與硅膠吸附膜高效、專(zhuān)一地結(jié)合，經(jīng)過(guò)漂洗步驟，最大限度除去蛋白質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽離子和許多有機(jī)雜質(zhì)等，在低鹽條件下，RNA 被洗脫。可處理的RNA 樣品量可高達(dá) 100 μg。

本試劑盒純化的RNA 沒(méi)有蛋白的污染，所得的 RNA 可用于NGS RNA 文庫(kù)構(gòu)建、反轉(zhuǎn)錄熒光定量 PCR、 Northern blot、 Formation of ribonucleoprotein (RNP) complexes for genome editing、顯微注射、RNA 標(biāo)記、 RNA 干擾、轉(zhuǎn)染等下游實(shí)驗(yàn)。

適用范圍：

適用于回收≥15nt 的單鏈 RNA 或者雙鏈RNA。

產(chǎn)品特點(diǎn)

1.        快速：步驟少，操作簡(jiǎn)便，整個(gè)操作僅需 15 分鐘。

2.        高效：du特配方使本產(chǎn)品比一般試劑盒回收效率大大提高，并且不會(huì)抑制下游反應(yīng)。

注意事項(xiàng)

1.   使用前請(qǐng)檢查Buffer MRC 是否出現(xiàn)渾濁，如有混濁現(xiàn)象，可在 37℃水浴中加熱幾分鐘，即可恢復(fù)澄清。

2.   所有步驟均可以在室溫進(jìn)行，但是應(yīng)該迅速操作，減少RNA 降解機(jī)會(huì)。

3.   Wash Solution 1 和 Wash Solution 2/3 加入無(wú)水乙醇后，可以在常溫保存。

4.   Wash Solution 2/3 可能加入乙醇使用幾天后出現(xiàn)沉淀晶體，并不影響使用，直接 不吸晶體，吸上清使用就可以。

操作步驟

提示：

第一次使用前請(qǐng)先在 Wash Solution 1 瓶和 Wash Solution 2/3 瓶中加入無(wú)水乙醇，加入體積請(qǐng)參照瓶上的標(biāo)簽，并打?qū)礃?biāo)記。

1.    于冰上，用 RNase-Free H2O 將 RNA 樣品補(bǔ)足至 100 μl，加入 200 μl Buffer MRC，輕柔混勻。

2.   加入 375 μl （1.25 倍體積）無(wú)水乙醇，混勻，無(wú)需離心。

注意：如果希望回收大于 25nt 的 RNA，加 1.25 倍體積無(wú)水乙醇就可以；如果希望回收大于 15nt 的 RNA，可以加 2 倍體積無(wú)水乙醇。

3.    將上一步所得溶液加入一套吸附柱中（吸附柱套在收集管內(nèi)），13,000 rpm 離心 30 sec，棄濾液，將吸附

柱重新套回收集管。（吸附柱的最大容量是 700 ul，溶液較多時(shí)，可分兩次進(jìn)行）

4.    加入 700 μl Wash Solution 1（請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇!），13,000 rpm 離心 30 sec，棄濾液。

5.    漂洗：加入 500ul Wash Solution 2/3，13,000 rpm 離心 30 sec，棄濾液。

6.    二次漂洗：重復(fù)步驟 5 一次。

7.    干燥：將離心吸附柱于 13,000 rpm 離心 2 min，甩干殘留漂洗液。

8.   洗脫：將吸附柱置于一個(gè)新的 1.5 ml 離心管中，在吸附膜的中央懸空滴加 30 ~ 80 μl RNase-Free H2O，室溫放置 2 min，13,000 rpm 離心 1 min，收集 RNA 片段。

（注意：為增加回收效率，可將 RNase-Free H2O 在 80℃預(yù)熱，也可將得到的溶液重新加入到離心管中，室溫放置 2 min，再次離心收集。）

增強(qiáng)型RNA清潔純化試劑盒 RNA提取配套產(chǎn)品