諾博萊德 骨組織蛋白提取試劑盒

骨組織蛋白提取試劑盒 常備現(xiàn)貨

產(chǎn)品貨號(hào)：P4924

產(chǎn)品名稱：骨組織蛋白提取試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格：50T/100T

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

中文名稱：骨組織蛋白提取試劑盒

規(guī)格：50T ; 100T

儲(chǔ)存條件：2-8℃，1 year

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder P4924 骨組織蛋白提取試劑盒

適用樣本：動(dòng)物組織

產(chǎn)品介紹

骨組織總蛋白提取試劑盒適用于從各種動(dòng)物骨組織中樣品中提取總蛋白。可以提取各種密質(zhì)骨與松質(zhì)骨、軟骨組織樣品?？梢杂糜谛迈r骨組織樣本或脫鈣骨組織樣本。提取過(guò)程簡(jiǎn)單方便，可在1小時(shí)內(nèi)完成。

該試劑盒蛋白提取液能充分裂解骨細(xì)胞，成骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞，其中含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對(duì)蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。

本試劑盒提取的蛋白可用于 Western Blotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫沉淀、ELISA、轉(zhuǎn)錄活性 分析、Gel shift 凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)、酶活性測(cè)定等下游蛋白研究實(shí)驗(yàn)。

本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構(gòu)象的活性蛋白，下游應(yīng)用范圍廣，提取液裂解細(xì)胞 的能力較溫和，需要根據(jù)實(shí)際樣本情況優(yōu)化裂解時(shí)間。

注：

1. 蛋白酶抑制劑未開(kāi)蓋使用前也可以2-8℃儲(chǔ)存。開(kāi)蓋使用后-20℃儲(chǔ)存。

2. 蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時(shí)是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時(shí)間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。

3. 試劑拆封后請(qǐng)盡快使用完！

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

骨組織總蛋白提取試劑盒適用于從各種動(dòng)物骨組織中樣品中提取總蛋白?？梢蕴崛「鞣N密質(zhì)骨與松質(zhì)骨、軟骨組織樣品?？梢杂糜谛迈r骨組織樣本或脫鈣骨組織樣本。提取過(guò)程簡(jiǎn)單方便，可在1小時(shí)內(nèi)完成。該試劑盒蛋白提取液能充分裂解骨細(xì)胞，成骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞，其中含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對(duì)蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。

本試劑盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫沉淀、ELISA、轉(zhuǎn)錄活性分析、Gel shift凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)、酶活性測(cè)定等下游蛋白研究實(shí)驗(yàn)。

本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構(gòu)象的活性蛋白，下游應(yīng)用范圍廣，提取液裂解細(xì)胞的能力較溫和，需要根據(jù)實(shí)際樣本情況優(yōu)化裂解時(shí)間。

自備試劑和儀器

離心機(jī)、振蕩器、勻漿機(jī)/勻漿器、渦旋混勻器、移液器、冰箱、冰盒，PBS緩沖液、蛋白定量試劑盒，離心管、吸頭、一次性手套

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1、使用方便。

2、含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。

3、紫外檢測(cè)蛋白濃度時(shí)，背景干擾低。

4、蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含 6 種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性。

使用方法：

一、      使用注意事項(xiàng)：

1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，取得優(yōu)良實(shí)驗(yàn)效果

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。

3. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷；所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。

4. 蛋白酶抑制劑儲(chǔ)存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。

5. 如果試劑盒不能短時(shí)間內(nèi)用完，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。

6. 可以根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。

7. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。

8. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

二、操作步驟

1. 提取液制備：

根據(jù)樣本數(shù)量，按每500μl冷的骨組織蛋白提取液A中加入2μl蛋白酶抑制劑和2μl蛋白穩(wěn)定劑，混勻

后置2-8℃?zhèn)溆谩?/span>

2. 取新鮮骨組織樣品，在4℃，用pH7.4的PBS緩沖液或生理鹽水中充分浸泡。換新鮮生理鹽水/PBS

再次充分浸泡，然后用純水清洗，去除血液，紅細(xì)胞。

3. 將骨組zhi剪碎，稱重后放入裝有液氮的研缽中，將骨組織磨成粉末，保持液氮不能wan全揮發(fā)。

4. 將骨組織粉末加入離心管中，按每200mg骨組織加入500μl蛋白提取液。

5. 混勻后在4℃條件下振蕩30分鐘。

6. 在80-100w，5s超聲/5s間隔條件下冰浴超聲20次。

7. 在4℃，12000×g條件下離心10分鐘。

8. 將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管，即得到骨組織總蛋白。

9. 上述蛋白提取物直接用于下游實(shí)驗(yàn)或分裝后于-80℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/span>

常見(jiàn)問(wèn)題分析：

①提取速度慢？

為了充分保證提取得到的蛋白的活性，提取液采用du特的保護(hù)蛋白的配方，裂解能力溫和，下游應(yīng)用范圍廣。適當(dāng)延長(zhǎng)裂解的時(shí)間即可。

②蛋白濃度低？

處理部分組織樣本時(shí)可能沒(méi)有裂解wan全，導(dǎo)致蛋白濃度低。只要適當(dāng)延長(zhǎng)試劑A的處理時(shí)間即可。最好在持續(xù)振蕩的條件下處理，沒(méi)有振蕩器也可間隔幾分鐘用吸頭吹打混勻。

③用什么方法定量蛋白？

建議用BCA法。不適合用Bradford法，因?yàn)樵噭〢中含有干擾Bradford法的組份，導(dǎo)致定量不準(zhǔn)。如果已經(jīng)進(jìn)行過(guò)透析處理或者用脫鹽柱改換過(guò)緩沖體系，則可以用Bradford法定量。

④提取的蛋白具有活性嗎？

本試劑盒不含有離子型去垢劑組份，不破壞蛋白的結(jié)構(gòu)，沒(méi)有對(duì)蛋白質(zhì)之間原有的相互作用的破壞，蛋白均保持其天然構(gòu)象和活性。

注意事項(xiàng)：

1. 本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。

2. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并che底清除殘留清潔劑。

3. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

4. 避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

骨組織蛋白提取試劑盒 常備現(xiàn)貨

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P4924  骨組織蛋白提取試劑盒  50T/100T