諾博萊德 大腸桿菌膜蛋白提取試劑盒

大腸桿菌膜蛋白提取試劑盒 常備現(xiàn)貨

產(chǎn)品貨號(hào)：P5032

產(chǎn)品名稱：大腸桿菌膜蛋白提取試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格：50T/100T

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

中文名稱：大腸桿菌膜蛋白提取試劑盒

規(guī)格：100T ; 50T

儲(chǔ)存條件：2-8℃，1 year

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder P5032 大腸桿菌膜蛋白提取試劑盒

大腸桿菌膜蛋白提取試劑盒是一種高效的高產(chǎn)膜蛋白提取試劑盒。大腸桿菌膜蛋白提取試劑盒可以從各種大腸桿菌菌體中提取膜蛋白，可用于純化蛋白的粗品制備及膜蛋白制備。提取過(guò)程簡(jiǎn)單方便。該試劑盒含有蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對(duì)蛋白的降解，為提取高質(zhì)量的蛋白提供了保證。本試劑盒提取的蛋白可用于WesternBlotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫沉淀、ELISA、轉(zhuǎn)錄活性分析、Gelshift凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)、酶活性測(cè)定等下游蛋白研究實(shí)驗(yàn)。本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構(gòu)象的活性蛋白，下游應(yīng)用范圍廣，提取液裂解細(xì)胞的能力較溫和，需要根據(jù)實(shí)際樣本情況優(yōu)化裂解時(shí)間。本試劑盒中不含有EDTA，與金屬螯和層析等下游應(yīng)用兼容。

適用樣本：大腸桿菌

注：

1. 蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲(chǔ)存。開蓋使用后-20℃儲(chǔ)存。

2. 蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時(shí)是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時(shí)間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。

3. 試劑拆封后請(qǐng)盡快使用完！

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

大腸桿菌膜蛋白提取試劑盒是一種高效的高產(chǎn)膜蛋白提取試劑盒。大腸桿菌膜蛋白提取試劑盒可以從各種大腸桿菌菌體中提取膜蛋白，可用于純化蛋白的粗品制備及膜蛋白制備。提取過(guò)程簡(jiǎn)單方便。該試劑盒含有蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對(duì)蛋白的降解，為提取高質(zhì)量的蛋白提供了保證。

本試劑盒提取的蛋白可用于 WesternBlotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫沉淀、ELISA、轉(zhuǎn)錄活性分析、Gelshift 凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)、酶活性測(cè)定等下游蛋白研究實(shí)驗(yàn)。

本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構(gòu)象的活性蛋白，下游應(yīng)用范圍廣，提取液裂解細(xì)胞的能力較溫和，需要根據(jù)實(shí)際樣本情況優(yōu)化裂解時(shí)間。

本試劑盒中不含有 EDTA，與金屬螯和層析等下游應(yīng)用兼容。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1、使用方便，從大腸桿菌中提取蛋白不需經(jīng)過(guò)超聲破碎等前處理。

2、將蛋白提取的時(shí)間縮短至 30 分鐘-1 小時(shí)。

3、含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。

4、紫外檢測(cè)蛋白濃度時(shí)，背景干擾低。蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含 6 種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括絲an酸蛋白酶、半胱an酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

5、本品不含 EDTA，可以用于金屬螯合層析等下游應(yīng)用。

使用方法：

一、使用注意事項(xiàng)：

1、旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底，避免開蓋時(shí)液體灑落。

2、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷；所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。

3、蛋白酶抑制劑儲(chǔ)存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。

4、蛋白酶抑制劑在2-8℃時(shí)是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時(shí)間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。

5、提取液A在使用前須一直置于2-8℃條件，否則下游膜蛋白提取時(shí)會(huì)導(dǎo)致不容易分層。

6、可以根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。

二、操作步驟：

1.提取液制備：

每 500ul 冷的提取液 A 中加入 5ul 提取液 B 和 2ul 蛋白酶抑制劑混合物，充分混勻后置冰上備用。

2.離心收集菌體，用 PBS 洗菌體 2 次。

3.按每 100-150mg 濕重菌體樣本加入 500ul 冷的提取液 A(大約菌體和提取液體積比 1:3-1:5，wan全淹沒菌體即可)，吹打混勻，在 2-8℃振蕩 1-2 小時(shí)，至菌體裂解wan全，菌體沉淀減少。

4.將菌體提取液在 2-8℃低溫下 12000×g 離心 5 分鐘，棄沉淀，取上清。

5.將上清液在 37℃水浴 10 分鐘。

6.在 37℃，1000×g 離心 3 分鐘。

7.此時(shí)液體分為 2 層，小心移除上層溶液，留管底部下層，大約 50ul 液體。

8.用 50-200ul 冷的膜蛋白溶解液溶解該下層部分，即得大腸桿菌膜蛋白樣品。

9.將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌?shí)驗(yàn)。

注意事項(xiàng)：

1. 本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。

2. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并che底清除殘留清潔劑。

3. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

4. 避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

如果試劑不小心接觸皮膚或眼睛，應(yīng)立即用水沖洗。

大腸桿菌膜蛋白提取試劑盒 常備現(xiàn)貨

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