諾博萊德 丙二醛(MDA)含量檢測(cè)試劑盒 Malondialdehyde(MDA) Content Assay Kit

丙二醛(MDA)含量檢測(cè)試劑盒   抗逆系列

產(chǎn)品貨號(hào)：BC8808

產(chǎn)品名稱：丙二醛(MDA)含量檢測(cè)試劑盒 Malondialdehyde(MDA) Content Assay Kit

產(chǎn)品規(guī)格：50T/48S

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

中文名稱：丙二醛(MDA)含量檢測(cè)試劑盒

英文名稱：Malondialdehyde(MDA) Content Assay Kit

規(guī)格：50T/48S

檢測(cè)方法：可見(jiàn)分光光度法 Spectrophotometer

儲(chǔ)存條件：Store at 2-8℃，6 months

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder BC8808丙二醛(MDA)含量檢測(cè)試劑盒 Malondialdehyde(MDA) Content Assay Kit

氧自由基作用于脂質(zhì)的不飽和脂肪酸，生成過(guò)氧化脂質(zhì)；后者逐漸分解為一系列復(fù)雜的化合物，其中包括丙二醛（MDA）。通過(guò)檢測(cè)MDA的水平即可檢測(cè)脂質(zhì)氧化的水平。

丙二醛（MDA）在酸性和高溫條件下，可以與硫代巴bi妥酸（thiobarbituric acid，TBA）縮合，生成棕紅色的三甲川（3,5,5-三甲基惡唑-2,4-er酮），其最大吸收波長(zhǎng)在532nm。進(jìn)行比色后可估測(cè)樣本中MDA的含量。

產(chǎn)品說(shuō)明：

氧自由基作用于脂質(zhì)的不飽和脂肪酸，生成過(guò)氧化,脂質(zhì);后者逐漸分解為一系列復(fù)雜的化合物，其中包括丙二醛(MDA)。通過(guò)檢測(cè)MDA的水平即可檢測(cè)脂質(zhì)氧化的水平。

丙二醛(MDA)在酸性和高溫條件下，可以與硫代巴bi妥酸(thiobarbituric acid，TBA)縮合，生成棕紅色的三甲川(3,5,5-三甲基惡唑-2,4-er酮)，其最大吸收波長(zhǎng)在532nm。進(jìn)行比色后可估測(cè)樣本中MDA的含量。

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。

操作步驟：

一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn))

1、細(xì)菌、細(xì)胞樣本的制備：收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清;按照每500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次)：8000g4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

2、組織樣本的制備：稱取約0.1g組織，加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿：8000g4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

3、血清(漿)：直接檢測(cè)。

4、高脂血或者油脂類樣本：取40μL樣本和80μL無(wú)水乙醇混合(即樣本被稀釋3倍)，渦旋震蕩5min后使用。不同高脂肪類樣本可能會(huì)有不同的稀釋倍數(shù)，可以稀釋不同倍數(shù)進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)以確定最佳稀釋倍數(shù)。同時(shí)操作表中空白管的蒸餾水應(yīng)以(66μL蒸餾水+134μL乙醇)代替。

二、測(cè)定步驟

1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，蒸餾水調(diào)零。

三、MDA含量計(jì)算

(1)按照蛋白濃度計(jì)算

MDA含量(nmol/mg prot) =[ΔAxV 反總÷ (εxd) x10°]+(CprxV 樣本) xF =32.258xΔA+CprxF

(2)按照樣本質(zhì)量計(jì)算

MDA含量(nmol/g質(zhì)量)=[ΔAxV 反總+(εxd) x10]+(WxV 樣本+V 提取) xF=32.258xΔA+WxF

(3)按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

MDA含量(nmol/10*cell) =[ΔAxV 反總÷ (exd) x10°]+(NxV 樣本÷V 提取) xF = 32.258x△A÷NxF

(4)按照體積計(jì)算

MDA含量(nmol/mL)=[ΔAxV 反總÷ (exd) x10]+V 樣本xF =32.258x△AxF

V反總：反應(yīng)體系總體積,0.001L;s：MDA摩爾吸光系數(shù)，1.55x105L/mol/cm：V樣本：加入樣本體積,0.2mL;d：比色皿光徑，1cm;V提取：加入提取液體積，1mL：Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL：W：樣本質(zhì)量，g;N：細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù)，以萬(wàn)計(jì)：109：?jiǎn)挝粨Q算系數(shù)，1mol=10°nmol：F：稀釋倍數(shù)，高脂血或者油脂類樣本需乘以稀釋倍數(shù)。

注意事項(xiàng)：

若發(fā)現(xiàn)檢測(cè)樣本吸光值過(guò)低，可以將沸水浴時(shí)間60min調(diào)整為90min或者更長(zhǎng)，但同一實(shí)驗(yàn)中的MDA的檢測(cè)都需要延長(zhǎng)到同一時(shí)間以免引起誤差。

丙二醛(MDA)含量檢測(cè)試劑盒   抗逆系列

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BC8808丙二醛(MDA)含量檢測(cè)試劑盒 Malondialdehyde(MDA) Content Assay Kit 50T/48S