諾博萊德 考馬斯亮藍(lán)G250染料試劑

考馬斯亮藍(lán)G250染料試劑   凝膠染色

Bradford 法是常用的蛋白濃度檢測(cè)的方法，與傳統(tǒng)方法相比，更簡(jiǎn)單、更穩(wěn)定、兼容性更 好，Bradford 法測(cè)定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響。樣品中β-巰基乙醇的濃度可高達(dá)1M，DTT的濃度可高達(dá)5mM，但受高濃度的去垢劑的影響明顯，故在用BradfordProtein Assay Kit 進(jìn)行蛋白定量時(shí)，需確保SDS低于0.01%，TritonX-100低于0.05%，Tween20,60, 80 低于0.015%，含高濃度去污劑的蛋白定量，建議采用BCAProteinAssayKit。

考馬斯亮藍(lán)G250染料試劑由考馬斯亮藍(lán)G250、乙醇、磷酸等組成，用于考馬斯染料結(jié)合 (Bradford)分析的總蛋白測(cè)量，其特點(diǎn)在于對(duì)蛋白樣品中可能存在的大多數(shù)鹽、溶劑、緩沖液、 硫醇、金屬螯合劑、還原性物質(zhì)等均不排斥，檢測(cè)濃度下限達(dá)到25μg/ml，最小檢測(cè)蛋白量達(dá)到 0.5μg，待測(cè)樣品體積為1～20μl，在50~1000μg/ml濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系。

自備材料

1、酶標(biāo)儀或分光光度計(jì)

2、蒸餾水

3、96 孔板或比色杯

操作步驟(僅供參考)

1、稀釋蛋白標(biāo)準(zhǔn)(一般為BSA5mg/ml)使其終濃度為0.5mg/ml。注意：蛋白樣品在什么溶液中，蛋白標(biāo)準(zhǔn)也應(yīng)用什么溶液稀釋，也可以用0.9%NaCl或PBS稀釋蛋白標(biāo)準(zhǔn)。

2、將標(biāo)準(zhǔn)品按0,1,2,4,8,12,16,20μl 加到 96 孔板的蛋白標(biāo)準(zhǔn)孔中，加蛋白標(biāo)準(zhǔn)稀釋液補(bǔ)足至 20μl。

3、加適當(dāng)體積樣品到96孔板的樣品孔中，補(bǔ)加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液至20μl。

4、各孔加入200μl考馬斯亮藍(lán)G250染料試劑，室溫放置3～5min。

5、酶標(biāo)儀測(cè)定595nm波長(zhǎng)處的吸光值，560~610nm之間的波長(zhǎng)也可。

6、根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中的蛋白濃度。

考馬斯亮藍(lán)G250染料試劑   凝膠染色

產(chǎn)品訂購(gòu)信息：

P2810 考馬斯亮藍(lán)G250染料試劑  100ml / 500ml