諾博萊德  Fluo-4，AM 鈣熒光探針Fluo-4，AM

Fluo-4，AM 鈣熒光探針   細胞功能檢測

產(chǎn)品貨號：F6388

產(chǎn)品名稱：Fluo-4，AM 鈣熒光探針Fluo-4，AM

英文名稱：Fluo-4，AM

產(chǎn)品規(guī)格：100ug/1mg/10*100ug

產(chǎn)品簡介：

別名：鈣熒光探針Fluo-4, AM

分子式：C₅₁H₅₀F₂N₂O₂₃

分子量：1096.94

外觀(性狀)：凍干粉（橙紅色）

激發(fā)波長/發(fā)射波長(Ex/Em)：494/516

儲存條件：-20℃干燥避光保存，有效期1年。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準

NobleRyderF6388 Fluo-4，AM 鈣熒光探針Fluo-4，AM是一種將Fluo-3 結(jié)構(gòu)中的Cl替換成F的鈣熒光探針。由于將Cl替換成了電子吸引力更強的F，它的最大激發(fā)波長會向短波長處偏離10nm左右。這個波長更接近于氬激光器的波長，所以用氬激光器激發(fā)時，F(xiàn)luo-4的熒光強度比Fluo-3強一倍。

Fluo-4, AM 穿透細胞膜進入細胞后被細胞內(nèi)的酯酶剪切形成Fluo-4，從而被滯留在細胞內(nèi)，F(xiàn)luo-4若以游離配體形式存在時幾乎是非熒光性的，但是當(dāng)它與細胞內(nèi)鈣離子結(jié)合后可以產(chǎn)生較強的熒光，最大激發(fā)波長為494nm，最大發(fā)射波長為516nm?？梢允褂眉す夤簿劢癸@微鏡或流式細胞儀檢測細胞內(nèi)鈣離子濃度的變化。

操作說明：（forHumanTcells）

1，試劑

2 mM 的Fluo-4,AM/DMSO （將1mgFluo-4,AM 溶于442µLDMSO ）

Pluronic F127

Hanks balanced salt solution（HBSS）：建議使用不含鈣鎂、不含酚紅的HBSS

HEPES buffer saline（10mM HEPES，1mM Na2HPO4，137mMNaCl，5mMKCl， 1mMCaCl2， 0.5mMMgCl2，5mMGlucose，0.1%BSA，pH7.4 ）

2，操作

（1）向Fluo-4,AM/DMSO 溶液中加入16.5mgPluronicF127，Pluronic F127 可以防止 Fluo-4,AM 在 HBSS 中聚合并能幫助其進入細胞。

（2）用HBSS 稀釋Fluo-4,AM 溶液，制備4µM 的Fluo-4,AM 工作液。

（3）將Fluo-4,AM 工作液加入細胞，在37℃培養(yǎng)20分鐘。

（4）加入5 倍體積的含有1%胎牛血清的HBSS，再繼續(xù)培養(yǎng)40分鐘。

（5）用HEPES buffersaline 洗滌細胞 3 次，然后用HEPESbuffersaline 使細胞重懸浮，制成1×105cells/mL 的溶液。

（6）37 ℃下培養(yǎng)10分鐘，然后用該細胞進行熒光鈣離子檢測。激發(fā)波長494nm，發(fā)射波長516nm 。

注意：標(biāo)記的條件因細胞種類而異，在每次實驗前，請先確定最佳條件。以上方法僅供參考。

Fluo-4，AM 鈣熒光探針   細胞功能檢測

產(chǎn)品訂購信息

F6388 Fluo-4，AM 鈣熒光探針Fluo-4，AM  100ug/1mg/10*100ug